徠卡超薄切片機省去了普通超簿切片法中繁雜的化學固定與包埋操作，在細胞化學研究中有著特殊的用途。為了很好保存形態(tài)結構，必須使游離水形成玻璃態(tài)的冰，防止產(chǎn)生冰晶。這就要求很高的冰凍速率（~度/秒），這對于傳熱性能差的生物材料來說是困難的。一般除了盡可能地提高冷凍速率外，還可考慮采用盡可能小的樣品尺寸（小于1立方毫米），對樣品進行冷凍保護處理等，但通常也只能在樣品表面幾微米到幾十微米范圍內(nèi)能達到玻璃態(tài)。更深層將會因冷凍速率低而產(chǎn)生冰晶損傷。

 

　　徠卡超薄切片機快速冷凍常用的方法有三種：

　?、儆靡旱苯永鋬鲈跇悠芳苌系紊弦坏尉彌_液，放上預處理過的樣品，一起直接放入液氮冷凍。這種方法如上述由于存在汽泡絕熱層，冷凍速率低，效果不佳。

　?、陂g接冷凍法采用某些低熔點，高沸點，高熱容量及傳熱好的中間冷媒，如：乙烷、異戊烷、丙烷、氟里昂等。將一金屬容器置于液氮中，再將中間冷媒注入容器中，待中間冷媒冷卻后，然后把樣品投入個間冷媒的容器中冷凍。由于這些冷媒不會沸騰和形成絕熱泡層，因此，冷凍速率高，效果較佳。

　　③金屑接觸冷凍法將一銅塊至于液氮中，待溫度平衡后，取出銅塊并將樣品與它接觸0.3~0.5秒，使樣品冷凍后，投入液氮中，繼續(xù)冷凍。此法出于樣品預先冷凍，樣品放入液統(tǒng)中不會產(chǎn)生絕熱的汽泡層，冷凍效果較好，特別適用于無溶液制備法。

 

　　徠卡超薄切片機在進行切片之前要將樣品塊修整好。方法可用徠卡切片機修塊；也可在液氮中用一長柄刀片修整，但這兩種方法都不易掌握，效果不佳。較合適的方法是：將組織塊在戊二強固定的過程中，用刀片修整成適合于切片的梯形，并仔細放置在樣品架上進行冷凍。